中医诊断科研实验室建设情况

  本重点学科点拥有国家中医药管理局三级科研实验室— — 病理生理实验室(2003年授牌,编号TCM-03-130; 2009年换证,编号264),湖南省省级重点实验室"中医诊断学湖南省重点实验室"(2011年立项组建),湖南省高校重点实验室— — 中医病证实验室(2003年建设,2008年通过验收评估),为主要的学术研究基地。实用面积为400平方米,实验仪器设备价值300余万元。根据学科建设的研究方向,本实验基地已建立起较完整的专业检测室,包括微循环检测室、功能检测室、超声检测室; 生化免疫室、细胞培养室、基因诊断室; 病证规范研究室、图像信息分析室等配套的仪器设备和熟练的技术人员,从整体、器官功能、细胞和分子及发病学等方面体现了本重点学科的专业特点,已基本上能满足了本实验基地开展的四个研究方向的科研项目实验研究。

  实验室的建设根据本学科研究方向而构建,建立起"生化、基因检测室"、"细胞、电镜检测室"和"功能、形态检测室"三个所属机构,每个检测室已建立相应的实验技术平台开展中医病证规范化、辨证微观化、四诊客观化、教学现代化研究。基地建设的思路、规划、保障措施与学科建设总体目标相符合。

  1. 生化、基因检测室

  已建立并运用以下5项技术平台开展科学研究:

  A.生化检测技术:主要用于中医病与证相关的规范化研究,以及辨证微观化、四诊客观化的方法学探索。应用半自动生化光谱分析仪(S.500P型)、核酸蛋白分析仪(DU640型)对人体或动物血清、血浆、全血、组织匀浆液以及其他体液进行脂类、糖类、电解质类、酶类等物质的吸光度、浓度及酶活力的检测及DNA、RNA、蛋白质的浓度及吸光度的检测分析。

  B.酶免疫检测技术:主要用于中医辨证微观化的研究。应用酶标仪(550型)对人体或动物血清、血浆、组织匀浆液等进行各种抗原、抗体含量检测。

  C.DNA检测分析技术:主要用于中医病证规范化的研究。应用PCR仪(480型)、水平电泳仪(DYY-Ⅲ-6B型)对血液、细胞、组织等少量起始物循环生产大量核酸,检测DNA扩增、测序; 并对DNA进行限制性内切酶酶切、核苷酸序列测定,进行DNA的结构与功能的检测分析。

  D.双向电泳技术:主要用于中医四诊客观化的蛋白质组学研究。应用IPG Phor等电聚焦电泳系统(3101-1型)、双面垂直电泳槽(SE600型)进行第一向等电聚焦、第二向等梯度SDS-PAGE电泳(即将等电聚焦的胶条或管状凝胶放在SDS-PAGE凝胶上根据蛋白质分子量进行电泳分离)检测血液、细胞、组织的蛋白质结构、同工酶含量及物质的纯度。[page]

  E.细胞融合技术:主要用于中医辨证微观化的多信息融合研究。应用细胞融合仪(ECM830型)等仪器,使脉冲电场改变细胞膜的状态和通透性,达到将DNA导入细胞及促使细胞发生融合的目的。对血液、细胞、组织等进行基因转移,制备杂交细胞。

  2. 细胞、电镜检测室

  已建立并运用以下4项技术平台开展科学研究:

  A.细胞培养技术:主要用于中医四诊客观化的细胞水平观察。应用超净工作台(SW-CJ-1F)、倒置显微镜(XD-101型)、CO2培养箱(2300型)、电热恒温振荡水槽(DK-2型)、离心机(80-2型)、细胞计数器等仪器,通过物理或化学方式将细胞从组织中分离出来; 利用培养基模拟人体环境,观察细胞贴壁率、汇合度等生长、发育情况。

  B.图像处理与分析技术:主要用于中医病证规范化的代谢组学探索,以及中医面诊、舌诊的客观化研究。应用数字彩色显微图像分析系统对各种电泳凝胶、酶标板、显微涂片、图片进行显微图像分析、图片处理分析及输出。

  C.电镜检测技术:主要用于中医毛发望诊、指甲望诊的超微结构观察。应用扫描电子显微镜及组织导电法样品导电处理、细胞内部结构冷冻割断法、铸型技术、盐酸化学消化法等特殊样品制备技术开展超微观检测分析。

  D.计算机技术:主要用于中医病证规范化的证素研究。即应用贝叶斯统计方法,测算各因变量与自变量之间的相互依赖关系,用现有知识对未知事件进行预测,以达到对临床诊断与BN推算数据的预测分析。

  3. 功能、形态检测室

  已建立并运用以下5项技术平台开展科学研究:

  A.心功能检测技术:主要用于中医心— 脉病证相关的研究。应用心脏功能自动检测仪(XJS-ⅡB型)拾取心电、心音、心尖搏动及其微分、导纳、阻抗及其颈动脉搏动等生物信号,观察分析心脏功能。

  B.肺功能检测技术:主要用于中医肺病证候规范的研究。应用微电脑肺功能测试仪(CMS-2型)测定人体肺活量及服药后努力性肺活量,从而对肺通气功能作出判断。

  C.超声检测技术:主要用于中医病证相关的研究,应用超声诊断仪(SSD-630型)对人体心脏、肝、胆、脾、肾、子宫等器官的形态、大小、占位性病变进行检测分析。

  D.微循环检测技术:主要用于中医望诊的微观化研究。应用微循环彩色显微分析仪(TW-J型),直接观察人体甲襞、舌尖、球结膜以及动物的内脏及外周组织的活体微循环的形态、流态、流速、袢周情况。

  E.生物机能检测技术:主要用于中医实验教学研究。应用生物机能实验系统(BL-410型)及计算机对生物体内或离体器官的生物电信号或张力等非生物电信号进行检测。

  上述实验技术均有成熟的技术方法,配套的仪器设备和熟练的技术人员,从整体、器官功能、细胞和分子及发病学等方面体现了本学科的研究特点,能满足本室开展中医诊断的科研需要。

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